CRISPR(clustered, regμlarly interspaced, short palindromic repeats)是一種來自細(xì)菌降解入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫機(jī)制。在該機(jī)制中，Cas蛋白 (CRISP‐associated protein)含有兩個核酸酶結(jié)構(gòu)域，可以分別切割兩條DNA鏈。一旦與crRNA(CRISPR RNA)和tracrRNA結(jié)合形成復(fù)合物，Cas蛋白中的核酸酶即可對與復(fù)合物結(jié)合的DNA進(jìn)行切割。切割后DNA雙鏈斷裂從而使入侵的外源DNA降解。來自Streptococcus pyogenes的Cas9由于PAM識別序列僅為2個堿基(GG)，幾乎可以在所有的基因中找到大量靶點， 因此得到廣泛的應(yīng)用。Cas9蛋白在目前測試過的幾乎所有生物和細(xì)胞中均有活性，包括細(xì)菌、酵母、植物、魚、以及哺乳動物細(xì)胞。識別 RNA(gRNA)可以通過載體表達(dá)或者化學(xué)合成后與Cas9蛋白共同進(jìn)入細(xì)胞，對特異DNA序列剪切，從而促使DNA發(fā)生 NHEJ(nonhomologous end‐joining）導(dǎo)致的基因缺失或同源重組，實現(xiàn)基因敲除。
吉滿生物研發(fā)團(tuán)隊擁有豐富的細(xì)胞系構(gòu)建和基因編輯項目經(jīng)驗，致力于為廣大客戶提供定制的基因編輯細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù)。
我們的服務(wù)涵蓋基因敲除細(xì)胞系、條件敲除細(xì)胞系、基因敲入細(xì)胞系、定點突變細(xì)胞系、基因激活/抑制細(xì)胞系等。基于高效穩(wěn)定的細(xì)胞轉(zhuǎn)染系統(tǒng)和基因編輯系統(tǒng)，我們成功在不同細(xì)胞系實現(xiàn)基因編輯，包括但不限于易轉(zhuǎn)染細(xì)胞或難轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞和其他細(xì)胞。
敲除細(xì)胞系原理圖
